铁皮石斛多糖的提取和纯化方法

铁皮石斛中最重要的有效成分就是石斛多糖，它的药理作用主要表现在免疫、降血糖以及防癌、抗癌、抗衰老等方面。下面中国石斛网小编向大家介绍铁皮石斛多糖的提取和纯化方法。

一、铁皮石斛多糖的提取和纯化方法

铁皮石斛全草粉末经95%乙醇和丙酮提取后，加20倍水，于90℃温度下水浴1h，残渣反复提取3次。过滤，合并滤液，减压浓缩，4倍体积的95%乙醇沉淀数次，再溶解、浓缩、透析、冻干，得石斛粗多糖。称取0.2g石斛粗多糖样品溶于20ml双蒸水中，置于40ml离心管中，按样品溶液和脱蛋白试剂体积比为4：1加Sevag试剂(异戊醇：氯仿为1：4)5ml，振荡2min，常温下3000r/min离心20min，取上清重复上述操作，直至脱蛋白完全。上清加4倍95%乙醇，收集沉淀物依次用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤，挥去溶剂，真空干燥得粗制品，溶于热水，滤去不溶物。浓缩，干燥得石斛粗多糖。

二、铁皮石斛多糖的提取和纯化方法

称取1.0g石斛粗多糖溶于50ml水中，DEAE-纤维素柱(3.6cm×70cm)分批上样，然后依次用水、0.05mol/L、0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L和0.5mol/L的NaCl溶液洗脱，部分收集仪收集，以1.5倍洗脱液，柱温为12℃，流速为2ml/min。各洗脱峰分别收集合并，减压浓缩后水洗部分用透析袋脱盐，盐洗部分用SephadexG-10凝胶柱色谱脱盐，再次浓缩，冻干，结果获得不同组分的纯化石斛多糖。