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糖尿病(DM)是一组以高血糖为特征的终身性代谢疾病，易导致肾、眼、心脏、血管、神经的慢性损害和功能障碍。中医对糖尿病的认识始于《素问·阴阳别论》：“二阳结谓之消。”《金匮要略》：“病者如热状，烦渴，口干燥而渴，其脉反无热，此为阴伏，是瘀血也”即瘀可致消。《诸病源候论·消渴候》则以“消渴”为病证总名。现代中医对糖尿病的治则为“益气养阴、活血化瘀。本实验根据国家食品药品监督管理局(CFDA)《辅助降血糖功能评价方法》，将养阴药铁皮石斛与养血活血药当归联用，观察铁皮石斛当归复方提取液对高糖高脂加链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病小鼠降血糖作用。
1材料与方法
1．1 药物：铁皮石斛由浙江金华寿仙谷药业有限公司提供，当归由浙江中医药大学中药饮片厂提供。铁皮石斛当归复方提取液(TDF)即铁皮石斛、当归经水提取后配制成含生药量0.15、0.3、0.69／Ⅲl药液。
1．2动物：ICR小鼠，雄性，20—229，浙江省实验动物 中心提供，许可证号scxK(浙)2014—0001。
1．3试剂：链脲佐菌素(STZ，批号s0130，sigma公司)；高糖高脂饲料(浙江省实验动物中心)；葡萄糖(GLu)(批号l0010518，国药集团化学试剂有限公司)；葡萄糖试剂盒，批号15110201；甘油三酯(TG)试剂盒，批号15121501；总胆固醇(TC)试剂盒，批号1511040l，宁波康美生物科技有限公司；胰岛素(INs)测试盒，批号20160103，上海源叶生物科技有限公司。
1．4仪器：TBA一40FR全自动生化分析仪(东芝医疗系统株式会社)；Powerwave 340酶标仪(Bio—TEK公司)；雅培安妥超越血糖仪、血糖试纸(Abbott公司)。
1．5正常小鼠降糖实验：IcR小鼠分为正常对照组和TDF(6．09／kg)组，每组15只。分别灌纯化水与提取液，连续30d，末次给药后禁食4h，测空腹血糖(FBG)值。
1．6 2型糖尿病模型小鼠降糖实验：分述如下。
1．6．1造模与给药：雄性IcR小鼠分为正常对照组、模型对照组和TDF(1．5、3．0、6．09／kg)组，每组15只。TDF 组灌规定浓度提取液，模型对照组灌纯化水，连续30d。各组给予普通饲料，1周后模型对照组和TDF组更换高糖高脂饲料，喂饲3周后，模型对照组和3个剂量禁食24h，给予1％STz 80mg／kg Bw腹腔注射，注射后继续给予高糖高脂饲料5天。实验结束。
1．6．2 FBG、口服葡萄糖耐量(0GTT)：末次给药后禁食4h，测定空腹血糖即给葡萄糖前(0h)血糖值和血糖曲线下面积，各组按规定给药，15min后灌予葡萄糖 2.59／kg Bw，测定给葡萄糖后0.5、2h的血糖值及血糖 曲线下面积。血糖曲线下面积(Auc)=(0h血糖值+0.5h 血糖值)×0.5／2+(2h血糖值+0.5h血糖值)×1.5／2。
1．6．3总胆固醇(Tc)、甘油三酯(TG)：末次给药后禁食4h，检测血清Tc、TG水平。
1．6．4胰岛素(INs)、胰岛素抵抗指数(IR)：末次给药后禁食4h，检测INs水平，并计算IR。
1．7统计学方法：计量资料数据以戈±s表示，组间比较采用f检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2．1 对正常小鼠体重及空腹血糖的影响：TDF 6．09／kg 对正常小鼠体重及空腹血糖无明显影响。见表1。
2．2对2型糖尿病小鼠FBG、OGTT、AuC的影响：与正常对照组比较，给予葡萄糖0、0.5、2h，模型对照组血糖值及Auc均显著升高(P<0.01)；与模型对照组比较，TDF1.5、3.09／kg组各时间点血糖值及AuC均呈下降趋势，0.05)。提示TDF 1.59／kg可降低糖尿病小鼠空腹及餐 其中1.59／kg组0、2h血糖值及AUc明显下降(P< 后2h血糖值，并提高糖耐量。见表2。
2．3对2型糖尿病小鼠TC、TG水平的影响：与正常对照比较，模型对照组血清Tc、TG水平显著升高(P<0.01)；与模型对照组比较，TDF 1.59／kg组Tc、TG水平均呈下降趋势，其中TC水平明显降低(P<0.05)。提示TDF 1.59／kg具有降低糖尿病小鼠血清Tc功能。见表3。
2．4对2型糖尿病小鼠INs、IR的影响：与正常对照组比较，模型对照组IR显著升高(P<0．01)；与模型对照组比较，TDF 1.59／kg组IR明显下降(P<0.05)。提示TDF 1.5g／kg可提高糖尿病小鼠靶组织对胰岛素的敏感性。见表4。
3讨论
铁皮石斛味甘，性偏寒，具有滋阴、清热、润燥作用，用于高热、内热消渴者，脾胃虚寒的糖尿病患者则不宜连续服用；当归味甘，性温，为补血活血之要药。铁皮石斛佐以当归，一可起到相成作用，发挥补血活血之作用，直达病所；二加强或与铁皮石斛共同发挥降糖作用，增强药效；三以消除或减缓石斛的寒性，增加适应症、扩大应用人群。二药均为可用于保健食品的中药材(见卫生部2014版《药食同源目录》)。
造模前，小鼠精神状况良好，毛色光泽均匀，饮食饮水及大小便正常；造模后，模型组逐渐出现精神萎靡，掉毛，多饮，小便异味，个别出现皮肤溃烂等感染现象；TDF组较模型组状态佳。模型对照组0.5h血糖值≥ 10mmol／L，且较正常对照组0.5、2h血糖均升高，AUC升高，差异有显著性，判定模型糖代谢紊乱成立，在此基础上，模型对照组IR明显升高，差异有显著性，判定胰岛素抵抗糖／脂代谢紊乱模型成功。提示STZ可能仅损伤部分胰岛B细胞，剩余部分可代偿性分泌胰岛素，使其水平不降低，但组织对INS敏感性和反应性降低，不能摄取、储存和利用葡萄糖，即出现糖尿病症状。经TDF治疗后，糖尿病小鼠对INS敏感性增加，OGTT提高，餐后血糖值降低，提示TDF对2型糖尿病小鼠的降糖机制与改善胰岛素抵抗有关。
中药对复杂疾病的治疗一直具有其独特的作用和优势：不单改善症状，更能全面调理人体机能，恢复血管弹性，增加心、肝、肾、视网膜等组织营养性血流量，克服化学合成药的副作用和诱发的并发症；中药复方多成分、多靶点、多种作用机制的特征符合复杂疾病的治疗要求。可见，中医药治疗糖尿病值得进一步研究。
